Kullanma talimatý

CLOtest, gastrik mukoza biopsilerinde daha önceleri Campylobacter pylori olarak bilinen, Helicobacter pylori üreaz enzimini meydana çýkarýr.

Not: Sadece vücut dýþýnda týbbi tanýlarda kullanýlýr.

ÖZET

H.Pylori aktif kronik gastritin sebebi olarak gösterilir ve duedonal ülser hastalýðýnda gastrit ülser ve ülser olmayan dispepsia’da en belirgin etilojik faktör olarak belirtilir. Kronik yanmalara neden olarak H.Pylori mukozal savunmayý zayýflatýr. Epitelyum’u engelleyen asit ve pepsine imkan tanýr.

H.Pylori oldukça büyük miktarlarda üreaz enzimi üretir. Her ne kadar daha önceleri üreaz H.Pylori’e bir nitrojen kaynaðý olarak üreyi kullanmasýna imkan tanýrken ürenin bozulmasý da organizmaya düþük pH seviyesini tolore etmesini saðlayan yüksek lokal amonyak konstrasyonu üretir. (aþaðýdaki tepkimeye bakýnýz.)

(NH₂)₂ CO+ 2H₂O+H^{+ üreaz}  à 2NH⁺₄+HCO^-₃

                                               amonyum    bikarbonat

                                                               iyonu            iyonu               

Her ne kadar, H.pylori gastrik dokusunun histolojisi yada kültürü ile ortaya çýkarýlsa da ureaz’ýn varlýðýnýn ortaya çýkarýlmasýnda kullanýlan basit testler çok daha çabuk ve daha uygun týbbi tanýlarýn ortaya konmasýný saðlýyor.Gastirik ureaz’ý için testler H.pylori için sipesifiktir.Çünkü memeli hücreler ureaz üretmektedir ve H.pylori haricinde mide genellikle sterildir.

ÜRÜN TANIMI VE SAKLANMASI

CLOtest,üre,fenol kýrmýzýsý (bir pH indikatörü ), tampon ve bakteriostatik maddeler için biragar jelini içinde bulunduran yapýþýk bir plastik karttýr.Buraya yerleþtirilen bir doku örneði H.Pylori ureaz enzimi mevcutsa ürenin son yýkýmý pH’nin artmasýna neden olur ve jelin rengisarýdan parlak kýrmýzý renge doðru deðiþmeye baþlar.

CLOtest ( 36 – 48 F/2 – 8 °C ) derecedeki buzdolabýnda saklanmalýdýr.

CLOtest buzdolabýnda saklandýðý taktirde 18 aylýk bir saklama ömrü vardýr.Bu saklama ömrü,CLOtest’in havasý sýkýþtýrýlmýþ kaplarda saklanmasýyla uzatýlabilr.Tüm fonksiyonel özelliklere sahip CLOtest sarý renkli olmalýdýr.CLOtest’in uygun olarak çalýþýp çalýþmadýðýný kontrol etmek için bir üreaz pozitif ürününü jel üzerine enfekte edilebilir.Proteus spp.yada H.pylori gibi organizmalarýn üreazý pozitiftir.

Tetkik Maddesinin Elde Edilmesi ve Kullanýlmasý Hastanýn Hazýrlanmasý:

Hastalar endoskopinin en az üç hafta öncesinden antibiyotik veya bizmut tuzlarý kullanmamalýdýr.Bu maddeler tarafýndan H.pylori iþleminin engellenmesi her hangi bir þekilde organizmanýn tanýsýnýn ortaya konmasýnda güçlükler ortaya çýkartacaktýr.H.pylori yeniden geliþmesi kýrmýzý renkli olabileceðinden uygulanmadan sonraki ilk birkaç hafta negatif sonuçlara neden olabilir.

CLOtest’in Hazýrlanmasý:

1. Kullanýmdan önce,CLOtest’in tam olarak dolu  ve sarý renkli olduðundan  emin olmak gerekir.Eðer CLOtest sarýnýn haricinde farklý bir renkte ise bu CLOtest kullanýlmalýdýr.Eðer bir problem olursa CLOtest’i kullanmadan önce 001 801 572 6800 (Amerika’dakiler için) telefonunu arayýnýz.

2. Endoskopi öncesi,Clotest 30 – 40 C 86 – 104 F sýcaklýðýndaki bir kabýn üzerine yada doktorun cebine konulabilir.Sýcaklýðýn artmasý testin daha hýzlý çalýþmasýna neden olacaktýr.

Biopsi Parçasýnýn Alýnmasý ve yerleþtirilmesi:

1. CLOtest için biopsi örneði doktorun mide üzerinde inceleme yapar yapmaz alýnabilir.Biopsi yapmak için olaðan bölge büyük eðri boyunca antrumdur.

2. Biopsi, epitel kaybý yada ülser oluþumu tarafýndan etkilenen alandan ziyade normal doku görünümlü bir alandýr.Bu yüzden dolayý H.Pylori, epitelyum aþýndýysa yada mukus tabakasý soyulursa çok az miktarlarda ortaya çýkar.Standart biopsi forcepti yeterli boyutlarda tetkik maddesi temin eder. (1 – 3 mm/.04. 12 inc çapýnda)

3. Eðer biopsi parçasý çok küçük gibi  görünüyorsa, ikinci bir biopsi parçasýnýn alýnmasý kýymete deðer bir harekettir.Bu iki parça CLOtest’e yerleþtirilebilir.Ýkinci tetkik maddesinin birinci biopsinin yapýldýðý yerdeki kanla kirlenmemesine dikkat edilmelidir.

CLOtest Prosedürü:

1. CLOtest’i çevirin,böylece etiketi yukarýya gelecektir ve sarý jelin bulunduðu çukuru görmeyeceksiniz.

2. Plastik karttan etiketi çýkartarak sarý jeli görebilirsiniz.Etiketi tam olarak çýkartmayýnýz.

3. Bir steril iðne ile,biopsi forceptinden biopsi örneðini alýn ve sarý CLOtest jeli içerisine itin.Parçanýn jelin içinde tam olarak gömülüp gömülmediðine dikkat edin böylece en fazla temas haline geçmiþ olacaktýr.

4. Etiketin üzerinden elinizi sürerek etiketi plastik kartýn üzerine tekrardan yapýþtýrýnýz.Böylelikle jel kapanmýþ olacaktýr.CLOtest jelinin içine konan parçanýn sahibi olan hastanýn ismini ve içine konuþ tarihini yazýnýz.

5. Üç saat boyunca CLOtest’i ýlýk ortamda tuttuktan sonra (30 – 40 C/86 – 104 F), son okuma için kart oda sýcaklýðýnda saklanmalýdýr.

SONUÇLAR

CLOtest Okunmasý

1.Biopsi örneðinin üzerinde kan varsa, sarýdan farklý bir renk biopsi parçasýnýn kenarlarýnda görülebilir.Bu pozitif bir test deðildir.

2.Gelecek 24 saat içerisinde farklý zamanlarda CLOtest’e bakýn.Doktorun raporunu yazdýktan sonra CLOtest’e bakmasý,bir sefere CLOtest’i en iyi okumak için uygun olan en iyi zamandýr.Bu,hasta gitmeden önce H.pylori için testin pozitif olup olmadýðýnýn görünmesine imkan tanýr.

3.Eðer üreaz, biopsi örneðinin içindeyse, renk deðiþimi biopsi örneðinin çevresinde görülebilir yada CLOtest kýrmýzýnýn tonlarýndan birine dönüþecektir.Örnekte sadece az miktarlarda H.pylori mikrobu varsa,biopsinin çevresindeki kýrmýzý rengi görmenin yerine,tüm CLOtest jelinin rengi deðiþecektir.3 saat süresince portakal renginde olan jel,24 saat içerisinde kýrmýzý tonlarýndan birisine dönüþecektir.Eðer 24 saat boyunca jelin rengi kavuniçi ise test sonucu pozitif olacaktýr.

4.Biopsi örneðini jelin içerisine koyduktan sonra 24 saat boyunca CLOtest jeli sarý ise bu negatif teste iþarettir.Eðer ureaz biopsi örneðinin içersinde ise,renk deðiþimi biopsi örneðinde baþlayacaktýr ve tüm jeli deðiþtirecektir.Sarý renginden baþlayan tüm jelin renk deðiþimi bir pozitif test olacaktýr.Bu kýrmýzýnýn normal tonlarýndan birisi olacaktýr.(magenta,pembe,kavuniçi vs.)Jelin içine örnek konduktan 24 saat sonra CLOtest ‘i okumayýn.

KUSUR EMNÝYETÝ PROTOKOLÜ:

CLOtest’in  BOZUK OLUP OLMADIÐINDAN EMÝN OLMAK ÝÇÝN

24 saat içerisinde CLOtest jeli hala sarý olarak duruyorsa,aþaðýdaki pozitif kontrol testi yapýnýz.

1.CLOtest kartýn arkasýndaki etiketi çýkartýn,böylelikle sarý bir jel göreceksiniz.

2.Bu jelin içerisine “CLOtest pozitif kontrol”örneðini koyunuz.

3.Kartýn arkasýnda CLOtest etiketini tekrardan yapýþtýrýnýz.

4.Beþ dakika bekleyiniz.

5.Pozitif renk deðiþiminin olup olmadýðýný kontrol etmek için jel içindeki renk deðiþimine bakýn.(Kýrmýzý yada magenta)

6.Eðer jel kýrmýzýya yada magentaya dönüþmezse,(Amerika distribütörü)Ballard  Medýcal Products’ý 801 572 6800 arayýnýz.

PERFORMANS ÖZELLÝKLERÝ

CLOtest hiçbir yanlýþ pozitif sonuç vermeksizin endoskopi odasýnda H.pylori enfeksiyonlarýnýn % 75’inin tanýsýný koymuþtur.Bir saate kadar pozitif hastalarýn % 85’i CLOtest tarafýndan belirlenmiþtir.Üç saat içerisinde % 90’ýný belirlemiþtir.3 ile 24 saat arasýnda hastalarýn diðer % 5’i CLOtest tarafýndan belirlenmiþtir.Bu tarihe kadar rapor edilmiþ olan en geniþ Amerikan arþtýrmasýnda,Dye et al histoloji için her hastadan antra biopsi parçacýðý alýnmýþtýr.Virjinya Üniversitesi’ne rutin olarak gelen 122 endoskopi hastasýndan da CLOtest için biopsi alýnmýþtýr.82 Hastanýn ayný zamanda örnek kültürleri de alýnmýþtýr.CLOtest’ler endoskopi hemþireleri tarafýndan okunmuþtur.Elde edilen sonuçlar,aþaðýdaki tabloda

Gösterilmiþtir.Pozitif CLOtest’lerin % 80’ibir saat önce rengi deðiþti.

Buna benzer sonuçlar Schnell et al tarafýndan Missori’de açýklanmýþtýr.

SINIRLAMALAR

H.pylori’nin çok az miktarlarda olduðunda yada bakteryum düzgün bir þekilde daðýlmadýðý durumda,yanlýþ negatif CLOtest sonucu ortaya çýkabilir.Örneðin:Hastalarýn %15’inde bakteri antrumda deðilde mide bünyesinde mevcuttur yada bunun tam tersi de olabilir.Ýntestinal (barsak) dokularýnýn dönüþümünün (metaplasia) yoðun olduðu hastalarda intestinal epitelyumda biopsi yapýlýr.Hpylori barsak mukozasýnda kümeler halinde birikmezse  (colonise) yanlýþ negatif CLOtest sonuçlarý ortaya çýkabilir.Bu yüzden dolayý biri antrumdan biri de vucut mukozasýnda olmak üzere iki CLOtest’te uygulanma durumu ortaya çýkabilir.

Eðer hasta son zamanlarda antibiyotik yada bizmut tuzu aldýysa CLOtest dahil olmak üzere H.Pylori içeren bütün testler hassasiyetinde azalma olacaktýr.

Antibiyotik ile salgýlama iþlevinin durdurulmasýndan sonra H.pylori’nin tekrardan büyümesi düzgün olarak gerçekleþmeyebilir.Tekrardan yanlýþ negatif sonucundan kaçýnmak için CLOtest için bir ekstra biopsi yapýlabilir.

Yanlýþ pozitif CLOtest sonuçlarý çok nadiren ortaya çýkar.Dye et al tarafýndan yapýlan çalýþmada,uzun süre stokta kalan iki yanlýþ pozitif CLOtest sonucu ortaya çýkmýþtýr ki bunlar zaten kullanýlmadan önce hafif kavuniçi rengini almýþlardý.Jelinin tam anlamýyla sarý olmadýðý CLOtest’leri kullanmayýnýz.Teorik olarak aklorhidri hastalýðýna sahip hastalarda yanlýþ pozitif CLOtest sonuçlarý ortaya çýkabilir.Örneðin,öldürücü anemisiolan,daha önceden bir gastrik ameliyatý geçiren yada son zamanlarda antasid yada H2 reseptör antegonistini yüksek dozlarda alan hastalarda ortaya çýkabilir.Asitin olmadýðý zamanlarda proteus spp gibi komensal organizmalar midede büyüyebilir ve ureaz oluþturabilir.H.pylori haricinde bakteri yüzünden yanlýþ pozitif reaksiyonu,bu bakterilerin h.pylori’den daha az ureaz üretmesinden dolayý üç saat öncesinden genellikle tepkimeye girmez.CLOtest’in performansýný çok kötü etkileyecek olan faktörler mevcutsa,H.pylori teþhisinin çürütülmesi için gram boyasý ve/veya histolojisi gibi diðer týbbi teþhis ölçütlerini kullanmalarý tavsiye edilir.

H.pylori için tedavilerden þu anda sadece % 50 – 75’i etkin olduðundan eradikasyon olup olmadýðýnýn belirlenmesi için tedavi bittikten sonra 28 gün hastaya yeniden yardým etmek çok önemlidir.Bu seferden önce alýnan biopsiler organizmanýn düzensiz olarak yeniden geliþmesinden dolayý yanlýþ negatif sonuçlar verebilir.Buna imkan tanýmak için midenin farklý bölümlerinden olmak üzere iki CLOtest’in uygulamaya konmasý beklenir.

BIBLIOGRAPHY

1.Marshall BJ,McGechie DB,Rogers PAR,Glancy RG,Pyloric Campylobacter infectýon and gastroduodenal disease.

Med J Aust 1985;149:439-44.

2.Mobley HL,Cortesa MJ,Rosenthal LE,Jones BD.Characterazation of urease from Campylobacter pylori

J.Clin Microbiol 1988;25(5):831-836

3.Marshall BJ,Warren JR,Francis GJ,Langton SR,Goodwin  CS,Blincow E.Rapid urease test in the management of Campylobacter pyloridis-associated gastritis.

Am J Gasroenterol 1987;82(3):200-210

4.Dye KD,Marshall BJ,Frierson HF,Barrett LJ,Guerrant RL,McCallum RW. Is CLOtest alone adeguate to diagnose Campylobacter pylori.

AmJ Gastroenterol 1988;83:1032 (abstract)

5.Schnell GA,Schubert TT,Barnes WG,Rupani MK.

Comparison of urease,H&E,and culture tests for Campylobacter pylori. Gastroenterology 1988;94(5):A410 (abstract).